عضو شوید

عضویت سریع

به وبلاگ من خوش آمدید

براي اطلاع از آپيدت شدن وبلاگ در خبرنامه وبلاگ عضو شويد تا جديدترين مطالب به ايميل شما ارسال شود

آمار مطالب

:: کل مطالب : 2233
:: کل نظرات : 0

آمار کاربران

:: افراد آنلاین : 1
:: تعداد اعضا : 2

کاربران آنلاین

آمار بازدید

:: بازدید امروز : 907
:: باردید دیروز : 740
:: بازدید هفته : 907
:: بازدید ماه : 4257
:: بازدید سال : 20082
:: بازدید کلی : 221989

پایان نامه بررسی ارتباط چند شکلیهای ژنتیکی GPX1 pro198leu و SOD1 A251G با خطر رد حاد پیوند کلیه

نوشته شده توسط : مدیر سایت

چکیده

پیوند کلیه راهکار درمانی برای بیماران مبتلا به مرحله نهایی بیماری کلیوی است. با وجود افزایش و پیشرفت چشمگیر این روند درمانی، هنوز به دلیل پاسخ ایمنی فرد گیرنده در برابر بافت دهنده، رد پیوند شایع و عامل اصلی عدم موفقیت این روش است. کلیه پیوندی مستعد قرار گرفتن در معرض رد حاد به دلایل متفاوت از جمله استرسهای اکسیداتیو است. استرس اکسیداتیو با تاثیر منفی بر عمر و عملکرد بافت پیوندی میتواند نهایتا منجر به رد پیوند گردد. آنزیمهای GPX1 و SOD1 از جمله آنزیمهای آنتیاکسیدان هستند. هدف از این پژوهش بررسی ارتباط چندشکلیهای GPX1 pro198leu (rs1050450) وA251G SOD1(rs2070424) با رد حاد پیوند کلیه است. در این مطالعه 262 بیمار دریافت کننده پیوند کلیه که 46 نفر از آنها دارای رد حاد بودند و 262 فرد سالم به عنوان کنترل مورد بررسی قرار گرفتند. تعیین ژنوتیپها با روش PCR-RFLP انجام و دادهها توسط نرمافراز آماری SPSS تحلیل شدند. پس از بررسی فراوانی آللی و ژنوتیپی در چندشکلی pro198leu GPX1 بین دو گروه بیمار و کنترل و همچنین بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه تفاوت معناداری مشاهده نشد. به عبارت دیگر فراوانی آللی و ژنوتیپی ژن GPX1 در چندشکلی یاد شده در بروز بیماریهای کلیوی منجر به پیوند و همچنین رد حاد پیوند کلیه نقشی ندارد. در بررسی چندشکلی A251G از ژن SOD1 نیز اختلاف معناداری میان دو گروه شاهد و بیمار و دارای رد پیوند و فاقد رد حاد پیوند مشاهده نشد. نتایج نشان میدهند که چندشکلی SOD1 A251G در ابتلا به بیماریهای منجر به پیوند کلیه و همینطور رد حاد پیوند دخیل نیست.

واژگان کلیدی: پیوند کلیه، رد حاد، استرس اکسیداتیو، GPX1، SOD1

فهرست مطالب

عنوان صفحه

فصل اول: مقدمه

1-1- پیوندکلیه ……………………………………………………………………………………………………………….	2
1-2- رد پیوند …………………………………………………………………………………………………………………	3
1-2-1- رد فوق حاد ………………………………………………………………………………………………………	3
1-2-2- رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………..	4
1-2-3- رد مزمن ……………………………………………………………………………………………………………	4
1-3- پیشگیری از رد آلوگرافت ………………………………………………………………………………………	5
1-4- استرس اکسیداتیو ………………………………………………………………………………………………….	7
1-5- گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) …………………………………………………………………………..	8
1-6- سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) …………………………………………………………………………….	9
1-7- هدف ………………………………………………………………………………………………………………………	11
1-8- فرضیه …………………………………………………………………………………………………………………….	11

فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده

2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 pro198leu و ارتباط آن با بیماریهای گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………	13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..	14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ………………………………………………………..	15

فصل سوم: مواد و روش انجام کار

3-1- نمونهگیری …………………………………………………………………………………………………………………	18
3-2- وسایل مورد استفاده ………………………………………………………………………………………………….	19
3-3- مواد مورد استفاده ……………………………………………………………………………………………………..	19
3-3-1- محلولهای لازم جهت استخراج ………………………………………………………………………	19
3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ……………………………………………………………….	20
3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ………………………………………………………..	20
3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده …………………………………..	20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ……………….	21
3-4-1- ساخت محلولهای مورد نیاز جهت استخراج …………………………………………………..	21
3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن ………………………………………………………………….	21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش PCR-RFLP ………………………………………………………………………	21
3-5-1- PCR …………………………………………………………………………………………………………………	21
3-5-2- پرایمرهای مورد استفاده …………………………………………………………………………………..	22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ………………………………………………..	23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G ……………………………………………………..	24
3-8- الکتروفورز ………………………………………………………………………………………………………………….	25
3-9- رنگآمیزی ژل …………………………………………………………………………………………………………..	26
3-10- تحلیل آماری …………………………………………………………………………………………………………..	27